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实验服务
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细胞实验  
细胞转染
发布时间:2015-01-27
细胞转染


一、服务介绍

细胞转染是指将外源分子如DNARNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。

二、实验原理

因为不同的细胞在生理代谢及分裂上均存在差异,因此研究者将外源遗传物质导入细胞的过程中需要选择不同的方式。目前,将外源物质导入细胞的方法主要分为三大类:1、脂质体(或是脂质体替代物)转染;2、电转;3、病毒感染。这三种方法互有优劣。脂质体或是脂质体替代物转染操作简便,价格低廉,但是对细胞毒性大。而且,有些细胞通过脂质体转染效率很低;电转操作方便快捷,但是需要专门的仪器,对细胞损伤也比较大;病毒感染克服了前两者的劣势,感染效率高,对细胞毒性小,但是病毒前期包装需要大量的时间和精力 。





三、实验流程

1. 转染试剂的准备

① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体[1] 体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染

管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在

加入合适体积的转染试剂,再次震荡。

3. 将混合液在室温放置10―15分钟。

4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。

5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。

6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。


四、服务说明

1、客户提供:

培养好的细胞和目标基因

2、公司提供:

基本实验步骤、图片、检测结果

3、实验周期:

大约1-2月左右,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。

、质量承诺

提供清晰的图片、可靠的检测数据和分析结果



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